该研究采用Illumina Hi-Seq2500高通量测序技术,对滇山茶的花叶(绿叶区和金叶区)的cDNA进行了转录组测序,分析滇山茶的花叶呈色机理.测序结果得到了228 862条单基因序列,筛选得到了4 851条差异表达基因.2 291条差异表达基因在GO数据库中有功能注释,1 826条差异表达基因被注释到COG数据库,这些差异表达基因被分为23个主要功能类别,其中大部分基因与滇山茶的生长和代谢有关.1 363条差异表达基因注释到了KEGG数据库,进一步筛选出了差异表达基因注释序列最多的15条代谢通路,其中卟啉和叶绿素代谢途径中的GluRS、δ-ALAD、ALAS基因和类黄酮合成途径中ANS、LAR、CHS基因与滇山茶的花叶形成密切相关.研究表明,滇山茶的花叶呈色是由于叶色相关代谢通路中大量的基因表达量发生变化引起的,并不是由单基因突变所致,病毒诱导的多个代谢途径基因沉默可能是滇山茶花叶呈色的主要原因.该研究丰富了滇山茶的转录组信息,并为滇山茶的彩叶品种培育提供了一定的参考.

应用PEF成功从奶牛脾脏中提取非特异性转移因子,并与常规提取法和复合酶提取法进行了比较。经理化特性分析,奶牛脾脏转移因子是以低分子多肽(<10kD)为主的混合物,含有少量核酸和氨基酸。实验表明,将物料溶解于6倍质量的磷酸盐(pH7.0)缓冲液中,在脉冲电场强度为25kV/cm,脉冲数为16μs,和流速为2mL/min的条件下,提取液中低分子多肽的含量有最大值9.85mg/mL。PEF提取率是常规方法的2倍,复合酶法的1.47倍。PEF法耗时短,操作简单,成本低。因此,PEF提取是一种很有希望的提取非特异性奶牛脾脏转移因子方法。